Пцр анализы что это такое


ПЦР Анализ что это такое: расшифровка

ПЦР-анализ: что это такое? Современная методика, используемая для обнаружения инфекционных недугов в организме, носит название полимеразной цепной реакции (ПЦР).Методом раскрывают скопление некоторых фрагментов ДНК в собранном биоматериале. Он основывается на неоднократном избирательном копировании выбранного участка ДНК за счет ферментов. Полимеразную цепную реакцию в 1983 году создал известный ученый Кэри Муллис.



Сущность анализа на инфекции

ПЦР — это индукционная методика обнаружения различных инфекций. Благодаря ПЦР допустимо распознать микроорганизмов, опираясь на полученные данные генетического биоматериала (ДНК и РНК).

Принцип деятельности полимеразной реакции несложен: взятый биоматериал помещают в микробиологический реактор. В его составе содержатся частицы ДНК микроба. Затем к данному биоматериалу докладывают определенные ферменты, которые соединяются с ДНК микроорганизма и выводят его аналог. Копирование ДНК осуществляется поэтапно: на начальной ступени из 1 молекулы ДНК создаются 2 новые молекулы, на вторичной ступени — из 2 появляется 4 и т. д. По прохождении множественных этапов одну копию ДНК заменяют тысячи аналогов.

Материалом для выполнения исследования на ПЦР могут послужить:

  • эпителиальные соскобы со слизистых оболочек;
  • моча и мокрота;
  • кровь, плазма, сыворотка;
  • биоптаты и др.

За счет эпителиального соскоба можно диагностировать заболевания, передающиеся половым путем (ЗППП). Для оценки на ЗППП используется мазок или кровь пациента. За счет ПЦР-оценки можно распознать вид инфекции, а также дать ей количественную оценку.

Другими словами, выявить число бактерий в органах человека. Количественный анализ считается наиважнейшим в диагностировании патологических процессов и в оценке результативности терапии инфекций хронического характера.

Правила подготовки к исследованию

Как берут анализ у женщин и мужчин? Изучение методом ПЦР позволяет добиться верного заключения, но тогда следует осуществить требуемую подготовку к нему. Перед сдачей анализа пациенту нельзя заниматься сексом за 24 ч до забора материала (при оценке соскоба, взятого из урогенитального тракта). Кровь нужно сдавать на голодный желудок, до сдачи материала запрещено есть и употреблять жидкость. Мочу сдают в аптечном контейнере, специалистам потребуется порция, собранная с утра. Для выявления вирусного гепатита С и ВИЧ-инфекции на диагностику берут кровь.

У женщин мазок не берут в период менструации. Его следует сдавать перед началом критических дней либо спустя несколько дней после их завершения. Перед сдачей мазка из урогенитального канала мужчины не должны осуществлять опорожнение мочевого пузыря примерно 1,5-2 ч. Перед забором материала на гонорею запрещено мыть наружные половые органы, делать спринцевание.

К тому же за 3-4 ч до взятия материала следует избежать сексуальных контактов и мочеиспускания. Для диагностики недугов половых органов у мужчин и женщин потребуются выделения.

Мочу следует отвезти в медлабораторию через 2-3 ч после ее сбора. Результат анализа  подготовят лишь спустя 1,5-2 дня. Отрицательный результат поясняет, что во взятой биожидкости вредных микроорганизмов не имеется. Положительный итог значит, что человеческий организм инфицирован. Иногда обнаруживается здоровое носительство: указывает на преобладание опасных вирусов, отсутствуют какие-либо симптомы.

Данное состояние не лечится, хотя нужно систематически обследоваться у специалиста. Отметим: распространение инфекции на здоровых людей от переносчиков вероятно. Вдобавок инфекция может перейти в хроническую стадию.

Насколько точна диагностика инфекций

Метод  славится достоверностью, оригинальностью и надежностью. Это значит, что такая оценка может:

  • с наибольшей степенью установить присутствие или дефицит вируса;
  • вывести достоверный вид инфекции;
  • определить бактерии даже при незначительном скоплении ДНК микробов в забранном биоматериале.

В сравнении с иммуноферментным анализом и иными способами диагностирования, ПЦР значительно реже дает ложноотрицательные результаты (заключение выходит отрицательное, когда в организме есть вирусы) и в основном не выносит ложноположительные (исследование указывает на развитие вируса при его отсутствии).

Что выявляет анализ

Оценка методом помогает обнаружить не только проявившиеся вирусы и инфекции у человека, но также скрытые, о которых пациент даже не подозревает.

В связи с этим всем людям, желающим стать в ближайшем времени родителями, рекомендуется выполнить анализ. В ходе исследования могут быть обнаружены разные виды папилломавируса человека, микоплазмы и уреаплазмы (уреалитикум и парвум), гарднереллы и кандиды, микобактерии туберкулеза (в разной форме заболевания), вирусы гепатита, хеликобактерная инфекция, ВИЧ, герпес и цитомегаловирус.

Все вышеуказанные вирусы и инфекции легко выявляются при сдаче анализа ПЦР. К примеру, вирус папилломы может спровоцировать при некоторых ситуациях (как вариант — сильно ослабленная иммунная система) появление на теле бородавок.

Анализ на гепатит С показывает генетический материал вируса. Количественный анализ на гепатит С позволяет выявить сосредоточение вируса в кровяной жидкости. Анализ на туберкулез разных локализаций дает возможность обнаружить активный туберкулез намного быстрее, чем бактериоскопический и бактериологический методы.

Вследствие того, что данный метод оценки является особо чувствительным к происходящим процессам в организме женщин и девушек, множество причин может оказать влияние на конечный итог. Из этого следует, что анализ ПЦР на ВИЧ не считается точным способом диагностирования. Лишь в 96-98% он показывает достоверный результат, а в остальном может указывать на неверную информацию.

Диагностика инфекционных болезней  во многих ситуациях считается легким способом выявления возбудителей на начальных этапах заражения.

Назначить пройти данные обследования может лечащий врач.

По вопросу расшифровки данного анализа следует обратиться к профессионалу. Требуется соблюдать все врачебные советы.

Автор: Е.Кубина

Есть проблемы, запишитесь на прием к врачу.

analizypro.ru

Кровь методом ПЦР что это и на какие инфекции сдается.

ПЦР – часто применяемый в венерологии и инфектологии метод выявления различных патологий.

Биоматериалом для исследований может служить любая биологическая жидкость. Многие инфекции могут быть выявлены в крови, если их ДНК попадает в системный кровоток. С помощью анализа крови на РНК или ДНК микроорганизмов можно выявить множество различных инфекций.

Таким способом диагностируют в основном:

  • вирусные инфекции
  • бактериальные инфекции в случае их генерализации

Реже ПЦР делают на грибки или паразиты. В большинстве случаев в крови определяются вирусы. Потому что другие группы микроорганизмов чаще создают локальные очаги воспаления. Но иногда происходит генерализация процесса.

Бактерии могут проникать в кровь, разноситься по организму. В этом случае проводится анализ крови методом ПЦР с целью их выявления.

Диагностика крови методом ПЦР бывает количественной и качественной. Иногда также проводятся полуколичественные тесты. При стандартном исследовании подтверждается или опровергается сам факт присутствия патогена в организме. Количественный метод используют для оценки уровня вирусной или бактериальной нагрузки. Полуколичественный способ используют для инфекций, которые иногда опасны, но в большинстве случаев не вызывают воспаления. Например, есть определенная концентрация, за границей которой есть риск патологии.

Тогда результатов может быть три:

  • ДНК не обнаружено
  • ДНК выявлено, но концентрация в пределах допустимой
  • ДНК обнаружено в высокой концентрации, достаточной для развития воспаления

При этом сами цифры, сколько именно копий ДНК содержит кровь в 1 мл, не указывают. Молекулярная диагностика методом ПЦР и дает возможность определить инфекции даже при небольшой концентрации возбудителей. Потому что данный диагностический тест обладает высокой чувствительностью.

У него также высокая специфичность. Ложноположительные результаты встречаются редко.

 

ПЦР крови на герпес

Этот анализ делают редко.

В основном ДНК вируса выявляют в биоматериале, полученном из поверхности высыпаний. Но анализ крови тоже делают. В ней могут быть обнаружены специфические участки ДНК.

Есть исследования с типированием или без него.

Часто анализ проводят сразу на 1 и 2 тип герпеса. При этом выявляется характерный для обоих типов фрагмент ДНК. То есть, он присутствует и у одного вируса, и у другого. Поэтому при положительном результате нельзя понять, каким типом заражен человек.

Часто это не имеет значения для определения терапевтической тактики. Потому что разные типы герпеса подавляются одними и теми же препаратами. Но есть значение для оценки прогноза заболевания.

Герпес 2 типа чаще рецидивирует. Соответственно, таким пациентам чаще назначается супрессивная терапия, направленная на снижение частоты обострений инфекции. Если возникает необходимость определения типа вируса герпеса, проводится ПЦР с типированием. В этом случае мишенью для выявления служат участки ДНК, характерные для одного либо другого вируса.

В результатах выдается не только «выявлено» или «не выявлено». Указывается и тип вируса простого герпеса.

 

Анализ ПЦР на герпес зостер

Варицелла зостер – это возбудитель ветрянки и опоясывающего лишая.

Данный вирус входит в семейство герпеса. При анализе крови с помощью ПЦР можно обнаружить его ДНК.

Проводится диагностика:

  • перед беременностью
  • при появлении симптомов опоясывающего лишая или ветрянки
  • для дифференциальной диагностики этих заболеваний с энтеровирусными инфекциями или простым герпесом

Хотя герпес зостер может долгое время пребывать в организме в случае перенесенной ветрянки, инфекция протекает в латентной форме.

Вирус «прячется» в нервных ганглиях.

Потому его ДНК в крови не определяется.

ПЦР даст позитивный результат, только если есть симптомы инфекции. Поэтому, если симптомы появились, а ДНК варицеллы зостер в крови нет, это означает, что болезнь вызвана другим возбудителем.

 

Анализ ПЦР на туберкулез

Кровь на туберкулез сдают из локтевой вены. Это требуется для обнаружения ДНК микобактерий в системном кровотоке. Исследование делают для того, чтобы дифференцировать ограниченные и генерализованные формы туберкулеза.

Показания, при которых врачи могут назначить этот анализ:

  • лихорадка с постоянными повышениями и понижениями температуры тела на фоне положительной туберкулиновой пробы
  • острое воспаление респираторных органов при наличии в анамнезе контакта с больным туберкулезом
  • дифференциальная диагностика ложноположительных результатов туберкулиновой пробы
  • рентгенологические признаки туберкулеза

Кроме того, женщины сдают менструальную кровь для выявления туберкулезного поражения репродуктивных органов.

Показания:

  • воспалительный процесс эндометрия
  • гистерографические признаки туберкулеза
  • бесплодие при исключении другой патологии

Результат выдается «обнаружено» или «не обнаружено». Выявление микобактерий – показание к назначению лечения.

 

Анализ крови на стафилококковую инфекцию методом ПЦР

Стафилококки являются условно-патогенными микроорганизмами. Это часть нормальной микрофлоры человека.

Бактерии живут на коже, в носу и мочеполовых органах.

Но иногда стафилококки способны вызывать тяжелые патологии.

При подозрении на генерализацию инфекции назначают ПЦР крови на стафилококк. Небольшое количество этих бактерий может присутствовать в крови в норме. Поэтому положительный результат выдается при их присутствии более чем 10 в 4 степени копий ДНК в мл крови. Это говорит о высокой вероятности заболеваний, таких как сепсис, менингит, пневмония стафилококковой этиологии.

С током крови бактерии могут попадать в различные органы. Установление этиологического фактора воспалительных процессов помогает подобрать более эффективное лечение.

 

Анализы ПЦР на паразитов

На глисты ПЦР крови не делают.

Для диагностики используют ИФА – определяют уровень иммуноглобулинов в крови. А также исследуют материал, который взят непосредственно из очага поражения.

Паразитами также считаются одноклеточные простейшие микроорганизмы. Это трихомонада и токсоплазма.

На трихомонаду ПЦР делают. Но исследуют на кровь, а мазок из урогенитального тракта, мочу или эякулят.

А вот на токсоплазму делают и анализ крови методом ПЦР. Этот патоген опасен для беременных. Поэтому часто анализы проводят как скрининг при подготовке к зачатию.

Основные показания к проведению ПЦР на токсоплазмы:

  • ВИЧ
  • планирование беременности
  • лимфаденопатия неустановленной этиологии
  • увеличение печени и селезенки
  • миозиты, энцефалиты, лихорадка непонятного происхождения

Специфичность теста ПЦР очень высокая – она достигает 98%. Паразиты выявляются в крови даже в малых количествах.

 

ПЦР на гепатит B количественный

Часто выполняется анализ крови методом ПЦР на гепатиты, которые передаются половым и парентеральным путем.

Хотя основными методами диагностики остаются серологические исследования крови. Диагноз обычно подтверждается путем определения антигенов и антител.

Тем не менее, ПЦР дает возможность:

  • выявить скрытую инфекцию
  • определить мутантные штаммы вируса гепатита B, при которых не обнаруживаются другие маркёры этого заболевания

ПЦР крови позволяет обнаружить ДНК вируса даже в инкубационный период.

В период ранней и поздней реконвалесценции генетический материал возбудителя исчезает из крови. Поэтому метод может применяться для подтверждения излеченности. Анализы проводят не только качественные, но и количественные.

Они позволяют оценивать:

  • вирусную нагрузку
  • риск перехода болезни в хроническую форму
  • риск тяжелого течения патологии
  • течение инфекции
  • динамику излечения (по уменьшению вирусной нагрузки)

С помощью количественного теста можно установить, какой вирус является главным виновником поражения печени. Ведь у одного пациента их может быть сразу несколько.

Часто ПЦР используют для обследования контактных лиц. Потому что это самый ранний маркёр вирусного гепатита В. Метод также позволяет обнаружить репликацию вирусов при хроническом течении заболевания ещё до появления клинических симптомов.

Введение в клиническую практику ПЦР позволило:

  • эффективно выявлять больных с низкой виремией
  • устанавливать взаимосвязь между вирусной нагрузкой и неблагоприятными исходами патологии

Стабильно высокая вирусная нагрузка – основание для противовирусной терапии.

 

Анализ крови на ПЦР гепатит C количественный

Исследование применяют для:

  • раннего обнаружения вируса гепатита С (РНК патогена выявляется в крови уже спустя 10-14 дней после инфицирования, в то время как антител ещё нет)
  • тестирования донорской крови
  • подтверждения излеченности (при выздоровлении РНК вируса больше не определяется в крови, в то время как антитела продолжают обнаруживаться ещё некоторое время)

ПЦР – более достоверный тест, чем анализ на антитела, который дает до 20% ложноположительных результатов. Метод дает возможность идентифицировать разные типы вируса.

В свою очередь это позволяет оценить прогноз заболевания и подобрать терапевтическую тактику. Кроме того, может использоваться анализ крови ПЦР количественный. Его назначают для оценки уровня вирусной нагрузки.

Исходная вирусная нагрузка оценивается для определения показаний к началу терапии. Она влияет на выбор схемы лечения.

В последующем анализ делают для оценки результативности терапии. Расшифровка анализа крови ПЦР на гепатит С дает возможность установить оптимальные дозы препаратов и сроки лечения.

 

Анализ крови ПЦР на ВИЧ

Основным исследованием для первичной диагностики ВИЧ-инфекции остается анализ крови на антитела.

ПЦР применяется в ограниченном количестве случаев. Это исследование необходимо для подтверждения диагноза при слабоположительном результате крови на антитела.

ПЦР также проводится для первичной диагностики ВИЧ у новорожденных. Потому что наличие у них антител ни о чем не говорит.

Ведь долгое время после рождения в крови детей циркулируют материнские антитела. Таким образом, серологические тесты не позволяют врачу узнать, вырабатывает организм малыша собственные иммуноглобулины или нет. В то же время ПЦР позволяет определить вирусную РНК.

Поэтому позитивный результат теста свидетельствует о том, что ребенок болен ВИЧ.

ПЦР сдают при наличии подозрения на острую инфекцию. То есть, когда человек только недавно заразился, и у него проявился гриппоподобный синдром. В этом случае серологические анализы крови могут ещё не дать положительные результаты. Ведь с момента заражения прошло слишком мало времени.

ПЦР дает положительные результаты гораздо раньше других тестов, даже в ранние периоды инфекции. Поэтому именно этот метод используется в острой фазе заболевания.

ПЦР применяется для оценки качества донорской крови. Тем не менее, для первичной диагностики ПЦР применяется не вместо серологических тестов, а в дополнение к ним.

Причин тому несколько:

1. ПЦР не выявляет ВИЧ 2 типа, который составляет около 0,5% случаев

2. Возможны мутации ВИЧ, и в этом случае искомый фрагмент РНК может быть не найден Проблему решает проведение ПЦР с двойной мишенью. В этом случае определяется не один, 2 фрагмента генетического кода.

3. Организм некоторых пациентов сдерживает развитие ВИЧ. Вирусная нагрузка у них ниже определяемой. То есть, ПЦР дает отрицательный результат. При этом антитела в крови присутствуют. Таких пациентов около 1% от общего числа инфицированных.

 

ПЦР на ВИЧ количественный

Количественное исследование применяется не для выявления, а для мониторинга инфекции. Это исследование определяет показания к лечению и оценивает его результаты.

Виремия обозначается в количестве копий в мкл. Нагрузка ниже 10 тысяч копий считается низкой.

Если она превышает 100 тысяч копий, то её называют высокой. Эти границы весьма условны. Потому что даже у одного пациента в разных образцах крови возможны колебания значений вирусной нагрузки. Показателем успешности лечения ВИЧ и её целью является неопределяемая вирусная нагрузка.

У каждого теста ПЦР есть граница чувствительности. Это количество копий генетического материала вируса, при котором они передают определяться в крови. Обычно это 50 копий в мкл.

Если уровень вирусной нагрузки ниже, она считается неопределяемой. Это благоприятный прогностический знак.

Он говорит о том, что:

1. Антиретровирусная терапия работает. К препаратам ещё не выработалась резистентность. Поэтому в замене препаратов и коррекции схемы лечения нет необходимости.

2. Уровень СД4 лимфоцитов не будет уменьшаться. То есть, иммунитет человека не страдает. Поэтому в ближайшее время ожидать оппортунистических инфекций нет оснований.

У некоторых пациентов наблюдаются всплески вирусной нагрузки. Это значит, что иногда анализ крови на ВИЧ методом ПЦР показывает положительный результат.

Но при этом вирусная нагрузка минимальная. Она обычно не превышает 200 копий в мкл. Это не говорит о том, что терапия стала неэффективной. Со временем вирусная нагрузка снова может снизиться до неопределяемого уровня.

Благодаря определению вирусной нагрузки анализ крови методом ПЦР позволяет:

  • определить стадию инфекционного процесса
  • дать прогноз развитию заболевания
  • оценить заразность человека
  • определить показания к назначению антиретровирусной терапии
  • оценить её эффективность
  • определить момент, когда стоит ввести другие препараты для терапии

 

Где сдают анализы ПЦР

Если вам нужно исследовать кровь методом ПЦР, обращайтесь в нашу клинику.

Мы предлагаем:

  • аккуратный забор биоматериала
  • соблюдение всех правил, позволяющих избежать загрязнения крови в пробирке (это может привести к ложноположительным результатам)
  • дополнительные методы диагностики инфекций
  • расшифровку анализов
  • при положительном результате – лечение инфекционных заболеваний

В нашей клинике работают опытные врачи.

Анализы ПЦР крови на гепатиты С и В, ВИЧ и другие патологии можно сдать по доступным ценам.

Если вам необходимо сдать анализы крови методом ПЦР, обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

 

 

www.venerologia.ru

что это такое, типы, как сдавать, расшифровка

Автор статьи

Практикующий-дерматовенеролог, окончил Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова.

Написано статей

60


Вирус папилломы человека (ВПЧ) – распространенное заболевание, протекание которого носит хронический характер и чревато рецидивами. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – один из самых современных способов диагностики папилломавируса. Этот способ считается надежным и позволяет выявить не только наличие вируса в организме, но также его тип и количество. ПЦР чувствителен даже к неактивной форме вируса, при которой отсутствуют внешние проявления в виде папиллом и кондилом.

Содержание статьи:

Общие сведения

Анализ строится на исследовании ДНК пациента с целью обнаружения в ней присутствия чужеродных элементов. Любая ДНК строится на основе четырех нуклеотидов, располагающихся в определенной последовательности. Когда в организм попадает вирус, происходит изменение порядка в этой цепи, что позволяет оперативно отследить деятельность даже незначительных инородных частиц. Метод ПЦР диагностики проводится с использованием вирусных частиц, что обусловливает быстрое деление клеток.

Такая диагностика способна отследить активность ВПЧ не только в момент его протекания в скрытой фазе, но и в инкубационный период, когда папилломавирус еще не успел заявить о себе. ПЦР позволяет выявить:  

  • наличие ВПЧ;
  • штаммы, которыми инфицирован больной;
  • количественное содержание вируса в организме.

Большинство людей инфицированы папилломавирусом, однако сильный иммунитет подавляет его проявления и не дает размножаться. Поэтому обнаружение ВПЧ качественным методом может быть не всегда оправдано. Это не рационально в случае, если вирус присутствует в организме, но его воздействие минимально и никак не вредит человеку. Тем не менее качественный анализ покажет положительный результат, чем может вести пациента в замешательство.

Поэтому для диагностики чаще всего применяют количественный метод, позволяющий отследить количество вируса в организме и определить, насколько опасна его деятельность. Кроме того, важно установить штамм ВПЧ. Они делятся по степени онкогенности: одни совершенно безопасны и способны вызывать только косметические проблемы, другие могут стать причиной возникновения рака.

Каждая ситуация требует индивидуального подхода, поэтому прежде чем сдавать анализ, желательно проконсультироваться с врачом. Он подскажет, каким методом и на какие штаммы лучше всего проверяться, исходя из состояния пациента.

Показания для анализа

Инфицирование ВПЧ возможно только при непосредственном контакте с зараженным человеком. Вирус попадает в кровь и начинает размножение в области верхних слоев кожи, что обусловливает появление его характерных признаков – возникновение папиллом и кондилом.  ВПЧ распространяется следующими путями:

  • при незащищенных половых контактах;
  • при естественных родах от инфицированной матери к ребенку;
  • контактно-бытовым путем через предметы общего пользования, личные вещи, одежду и т.д.;
  • во время тесного контакта с кожей больного.

Чаще всего диагностировать ВПЧ приходят люди, у которых видны внешние признаки болезни. Однако если они никак не проявляются, это не является гарантией отсутствия вируса. Он также может присутствовать в крови и развиваться бессимптомно. Это особенно характерно для высокоонкогенных типов вируса: 16 и 18 штамма, которые провоцируют возникновение рака. Направление на диагностику этих типов обычно происходит при обращении к профильным специалистам: гинекологу и урологу.  

Преимущества метода

ПЦР считается одним из главных методов диагностики и остается самым востребованным среди врачей. Он используется не только для выявления ВПЧ, но также помогает обнаруживать другие заболевания, передающиеся половым путем, гепатиты, скрытые инфекции и т.д. ПЦР диагностика обладает рядом преимуществ по сравнению с другими методами выявления заболеваний. Среди них:

  1. Высокая специфичность. Тест помогает с большой вероятностью отделить следы чужеродной ДНК от ДНК человека в рамках собранного материала.
  2. Высокая производительность. ПЦР представляет собой автоматизированный процесс, помогающий провести диагностику непосредственно в день сдачи анализа. Такая скорость исследования позволяет пациенту не волноваться о результате на протяжении долгого времени и получить результат уже через несколько дней.
  3. Возможность сделать сразу несколько анализов. На основании одного собранного образца можно провести диагностику для выявления нескольких заболеваний. Например, одновременно можно выявить возбудителя хламидиоза и гонореи. При этом такая процедура не сможет отрицательно повлиять на достоверность результата.
  4. Высокая чувствительность. Тест позволяет обнаружить деятельность вируса даже в инкубационный период, когда его концентрация очень мало. Это поможет предупредить развитие патологического процесса и начать своевременное лечение.

Недостатки метода

Существуют, однако, и некоторые отрицательные моменты в проведении ПЦР диагностики. Главный из них – возможность получения ложноположительного результата. Это происходит в случае, если лечение уже проведено, инфекция побеждена, но мертвые клетки еще остаются внутри тканей. Для обновления клеток необходимо время.

Если провести анализ раньше 2-3 месяцев, ПЦР может показать положительный результат, в действительности принимая уже мертвые клетки за живые. Метод не делает различий между ними, он нацелен на поиск ДНК вируса, которую может найти даже в уже отмерших клетках. Все это приводит к получению ложноположительного результата. Избежать такой ситуации можно, если сдавать анализ в установленный лечащим врачом срок.

Также существует риск ложноотрицательного результата. В этом случае пациент никак не может повлиять на качество диагностики, так как ложноотрицательный анализ – просчет лаборатории. Он может возникнуть если:

  • собранный материал неправильно транспортировался и хранился;
  • нарушается стерильность, и в полученные пробы попадают другие микроорганизмы;
  • реагенты были непригодными.

Для того чтобы исключить возможность получения ложноотрицательного результата, необходимо выбирать проверенную лабораторию с квалифицированным персоналом.

Виды методик

В рамках проведения ПЦР диагностики разработаны четыре метода тестирования. Каждый из них имеет свои особенности проведения и назначается, исходя из состояния пациента. Для выбора наилучшего способа необходимо проконсультироваться с врачом.

Качественный способ

Этот метод применяется для того, чтобы подтвердить или опровергнуть факт присутствия вируса в организме. Его основной недостаток – невозможность установить штамм ВПЧ (только 14-21 виды). Чаще всего качественный способ используется вместе с другими методами выявления папилломавируса. Результат при этом передается с помощью 2 оценок: «обнаружено» или «не обнаружено». То есть метод либо констатирует факт наличия чужой ДНК, либо показывает ее отсутствие. 

Генотипирование

Методика способна определить как просто наличие вируса в организме, так и установить его вид. Этот способ применяют, когда необходимо установить, осталась ли вирусная ДНК после лечения или случился рецидив вследствие нового заражения. Генотипирование позволяет оценить эффективность проведенного лечения посредством определения вида вируса. Если этот тот же штамм, от которого лечился больной, значит, терапия прошла безуспешно. Если же исследование показывает другой вид ВПЧ, можно говорить о повторном заражении. Результат также представлен формулировками «обнаружено» или «не обнаружено».

Комбинированный метод

Узкоспециализированный способ диагностики, основанный на соединении качественного метода и определения 16 штамма посредством генотипирования. Результат представлен 3 ответами: «не обнаружено», «обнаружен 16 штамм», «обнаружен ВПЧ с 16 типом включительно». Этот метод применяется при подозрении на наличие высокоонкогенного типа папилломавируса, способного вызывать у женщин рак шейки матки.

Количественный метод

Такой способ позволяет установить концентрацию вируса в организме и отследить развитие ВПЧ. Считается наиболее информативным, так как позволяет определить тяжесть протекающего процесса, исходя из которой, подбирается лечение. Основан на определении количества вирусных клеток в рамках исследуемых 100 тысяч. Когда их совокупность превышает 5, это свидетельствует о высокой концентрации папилломавируса, что повышает возможность появления раковых клеток. Если количество клеток меньше 3, концентрация указывается как незначительная.   

Как сдавать анализ

Специальной подготовки для проведения диагностики не требуется. Главное условие – не мочиться за несколько часов до процедуры. Желательно не вступать в половые контакты за 2-3 дня до обследования, а также не принимать алкоголь. При этом нельзя забывать о проведении процедур для поддержания интимной гигиены.

Как сдают анализ мужчины

Головка полового органа вместе с мочеиспускательным каналом обрабатывается физ. раствором. Врач использует специальную щеточку, вставляемую примерно на 4 сантиметра. С помощью легкого вращения собирается материал для исследования с уретры. Полученный анализ оставляется в пробирке и отправляется на дальнейшее исследование в лабораторию. Биоматериал при этом может храниться не более 2 суток с момента получения. 

Как сдают анализ женщины

Перед взятием анализа на шейку матки наносят стерильный раствор. Затем с помощью щеточки берется мазок из цервикального канала. Приспособление оказывается на глубине около сантиметра, потом врач делает соскоб со стенок вращательными движениями. Биоматериал помещается в пробирку, где находится примерно 15 секунд. Там врач обтирает его об стенки, а затем вынимает. После этого содержимое пробирки отправляется на диагностику. 

Забор биоматериала

Правильный забор материала – залог успешного проведения диагностики. Если при этом процессе нарушается стерильность, и в пробирку попадают чужеродные микроорганизмы, может произойти обнаружение «вируса», которого в действительности нет. Кроме того, ошибка может произойти из-за небольшого количества клеток, взятых на анализ.

Расшифровка анализа ПЦР

В зависимости от способа диагностики пациент увидит различные контрольные результаты. Графа «не обнаружено» свидетельствует о том, что вирус не присутствует в организме, либо его количество настолько незначительно, что не поддается обнаружению. Результат «обнаружено», соответственно, говорит о наличии патологического процесса.

Если пациент использовал количественный метод, расшифровка будет следующей:

  • Lg 5 и выше – показатель большой концентрации вируса;
  • Lg 3−5 – уровень вируса значительный, но не критический;
  • Lg меньше 3 – малозначимое количество вирусных клеток.

В любом случае точной расшифровкой должен заниматься врач, ведь на основании этого ставится диагноз. Кроме того, через какое-то время желательно повторить процедуру, чтобы исключить ложноотрицательный или ложноположительный результат.

Статьи по теме:

Поделиться в соцсетях:

papillomus.ru

ИФА и ПЦР: просто о сложных лабораторных методах диагностики инфекций

В лабораторной диагностике существует множество  методов выявления необходимого элемента в биоматериале. Для диагностики инфекционных заболеваний чаще всего используют два принципиально разных метода: ИФА и ПЦР. Мы предлагаем Вам ознакомиться с данными методами, чтоб понять плюсы и минусы каждого из них.

ИФА (иммуноферментный анализ) – это определение в крови пациента антител к инфекционным агентам. Антитела (иммуноглобулины, Ig) представляют собой белки, которые вырабатывает наша иммунная система в ответ на инфекцию. Для каждого возбудителя заболевания продуцируются сугубо индивидуальные антитела. Антитела «помечают» микробов, и по наличию таких «меток» на поверхности микробных клеток организм узнает цель для уничтожения. Антитела к одному возбудителю могут отличаться между собой по срокам появления: 
IgM – в острый период
IgG – если процесс хронический, или в качестве постоянного иммунитета (в зависимости от вида возбудителя)
IgA – при обострении хронического процесса
Метод ИФА ищет "следы" реакции на вторжение инфекции, а не саму инфекцию!
Из-за низкой цены и использования в качестве биоматериала крови, метод применяется в качестве скрининга. Например, при подозрении на паразитозы пациенты сдают кровь на определение антител к аскаридам, лямблиям и т.д. Если результат пришел положительным, то не стоит сразу приступать к лечению паразитов – необходимо сопоставить клиническую картину, результаты ИФА и, возможно, результаты других методов обследования. Стоит помнить, что после пройденного курса лечения антитела могут оставаться в нашем организме очень долго, даже после того, как инфекция покинула наше тело, т.е. остается, так называемый, «серологический шрам». 
Приведем пример: в ночном небе тысячи звезд. Многие из этих звезд уже давно погибли, но до нас до сих пор, веками, идет их свет. По сути, мы видим только след звезды. Свет есть, а звезды уже давно нет. Но если света нет, это не говорит о том, что звезды там не было. 
То же самое и с антителами. Их наличие не гарантирует присутствия в организме искомого инфекционного агента. Отсутствие антител не говорит о том, что инфекции нет. 
Если результат анализа методом ИФА положительный, то это значит, что нужно искать инфекцию более специфическими и дорогостоящими методами - ПЦР, бактериологические посевы. Возможен ложноположительный результат в случае, если несколько микробов обладают схожей антигенной структурой, тогда к разным микробам будут вырабатываться «похожие» антитела.

ПЦР – один из самых наукоемких методов. Он обнаруживает ДНК микроорганизма. Генетический материал индивидуален для любого микроба, а это значит, что метод обладает самой высокой специфичностью и не может «обознаться». Принцип ПЦР заключается в том, что в пробирке происходит многократное удвоение искомого генетического кода. В случае присутствия даже незначительного количества этого кода, произойдет увеличение его количества, и анализатор сможет «уловить» его наличие. Таким образом, ПЦР – «золотой стандарт» выявления инфекционных агентов. Однако, у этого метода есть и свои минусы. Во-первых, в отличие от ИФА, ПЦР может сказать о наличии возбудителя только в месте взятия биоматериала, которое ограничено мазком (например, с уретры или из носа). Во-вторых, за счет своей высокой чувствительности, ПЦР может обнаружить даже мертвые частицы микробов, что наблюдается сразу после лечения. В таком случае, результат будет ложноположительный.

Резюмируя вышесказанное, приведем таблицу сравнения этих двух методов друг с другом:

Характеристика метода

ПЦР

ИФА

Биоматериал Мазок / кровь Кровь

Цена

Выше

Ниже

Чувствительность

Выше

Ниже

Специфичность

Выше

Ниже

Срок выполнения

Дольше

Короче

«Человеческий фактор»

Отсутствует

Отсутствует

Подготовка к сдаче анализа

Требуется

Не требуется

Локализация возбудителя в организме

Только в месте взятия биоматериала

Роли не играет

Возможность определения стадии инфекционного процесса

Нет

Да

Отмена антибиотикотерапии при выполнении анализа

Да

Нет

Выявление возбудителя на ранней стадии

Да

Нет

Внимание! Данные «классические» методы диагностики в КДЛ «ОЛИМП» модифицированы: ПЦР выполняется в Real-time режиме, вместо ИФА используют ЭХЛ, что повышает качество исследований и сводит к минимуму вероятность ложных результатов. 

 

www.kdlolymp.kz


Смотрите также